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堿裂解法是的小量制備質(zhì)粒DNA的方法,可用于抽提微克級別的質(zhì)粒DNA,葡萄糖-Tris-EDTA溶液(GTE)、NaOH/SDS溶液和乙酸鉀溶液(5mol/L,pH4.8)是其常用試劑。
NaOH/SDS溶液由NaOH溶液和SDS溶液等組成,臨用前等量混合使用,溶液呈堿性,是堿裂解法提DNA的重要成分,其原理是當菌體在NaOH和SDS溶液中裂解時,蛋白質(zhì)與DNA發(fā)生變性,加入中和液(乙酸鉀溶液)后,質(zhì)粒DNA分子迅速復性,呈溶解狀態(tài),離心時留在上清中,由于蛋白質(zhì)和染色體DNA不復性而呈絮狀,離心時可沉淀下來。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。